NF-κBp65特异性siRNA重组腺病毒载体的构建

作者：陈连旭; 于长隆; 敖英芳; 余家阔; 崔国庆; 王健全

来源：中国运动医学杂志, 2009, 28(06): 647-650.

DOI：10.16038/j.1000-6710.2009.06.005

• NF-κBp65
• siRNA
• 腺病毒
• 软骨细胞
• RT-PCR NF-κBp65
• siRNA
• adenovirus
• chondrocyte
• RT-PCR

目的:构建核因子-κB(NF-κB)p65特异性小干涉核糖核酸(small interference RNA,siRNA)重组腺病毒载体。方法:设计特异性NF-κBp65siRNA的靶序列对应的双链DNA,插入腺病毒穿梭质粒,然后跟腺病毒骨架质粒共转染HEK-293A细胞,穿梭质粒和骨架质粒在细胞内整合包装重组腺病毒并用β-Gal染色鉴定。重组腺病毒扩增、纯化、滴度测定后,感染培养的大鼠关节软骨细胞,应用RT-PCR在mRNA水平观察NF-κBp65的表达。结果:β-Gal染色显示重组腺病毒载体构建成功,RT-PCR结果显示重组腺病毒有效抑制了目的基因NF-κBp65的表达。结论:特异性NF-...

• 单位
  北京大学第三医院