双光束光解离在牛泛素蛋白离子的自顶向下质谱分析中的应用研究

作者：焦鲁杨; 张凯林; 杜梦颖; 许一澄; 李树奇; 孔祥蕾^*

来源：分析测试学报, 2022, 41(01): 108-114.

DOI：10.19969/j.fxcsxb.21093008

• 自顶向下
• 离子活化
• 红外多光子解离(IRMPD)
• 紫外光解离(UVPD)
• 牛泛素蛋白
• 傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR MS)

自顶向下(Top-down)质谱分析方法是将完整蛋白质离子碎片化,从而在分子水平上提供更加精准、丰富的与蛋白质结构相关的生物学信息。该文首次将3μm红外激光与210 nm紫外激光共同引入到傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR MS)的分析池中,获得了牛泛素蛋白离子的自顶向下质谱。通过优化两束激光被引入的时间序列,使得蛋白质碎片离子的覆盖率进一步优化。实验发现将两束激光在时间序列上以部分重叠的方式引入时,可以更有效地实现蛋白离子的解离。对于+11价的牛泛素蛋白离子,双光束解离碎片覆盖率可达73%,高于基于单独的红外多光子解离(IRMPD)或紫外光解离(UVPD)方法所获得的结果。对其它价态的牛泛素蛋白离子也得到类似的提升。实验结果显示双光束解离方式对于丰富蛋白碎片离子的种类,提高碎片覆盖率有显著作用。

• 单位
  元素有机化学国家重点实验室; 南开大学; 天津化学化工协同创新中心; 天津理工大学