农杆菌介导遗传转化获得转CP4基因籼稻的研究

作者：胡欢; 李媛; 丁筠; 曹含章; 吕尊富; 李飞飞^*

来源：浙江农林大学学报, 2021, 38(02): 420-425.

• 籼稻‘中恢161’
• 胚性愈伤组织
• 农杆菌介导
• CP4基因
• 草甘膦

【目的】建立籼稻‘中恢161’Oryza sativa subsp. indica ‘Zhonghui 161’农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的转化体系。【方法】以籼稻‘中恢161’的成熟胚为材料,设置了5个草甘膦质量浓度(100、200、300、400和500 mg·L-1)进行胚性愈伤组织的草甘膦敏感性试验。利用农杆菌介导法,将草甘膦抗性基因CP4-EPSPS导入‘中恢161’的胚性愈伤组织中,转化后的胚性愈伤组织分别在含有300、350和400 mg·L-1草甘膦的选择培养基上进行抗性筛选。抗性愈伤组织进一步分化、成苗。【结果】草甘膦质量浓度为300～400 mg·L-1时,愈伤组织褐化率约50%,具有很好的选择效果。经统计,300、350和400 mg·L-1草甘膦抗性筛选后,愈伤组织阳性率分别为40.16%、61.72%和84.04%,抗性愈伤组织的分化率为46.43%,成苗率为32.84%。共获得67株再生小苗,经PCR检测,43株成功转入CP4基因,再生植株阳性率为64.18%。【结论】建立了‘中恢161’农杆菌介导的转化体系。图5参20

• 单位
  浙江农林大学