基于TMT标记联合LC-MS/MS阐释茵芪三黄解毒汤抗肝纤维化的药效作用机制

作者：强睿; 姚子昂; 韩东; 吕文良^*

来源：中华中医药杂志, 2023, 38(12): 5987-5992.

• 茵芪三黄解毒汤
• 肝纤维化
• 定量蛋白质组学
• 作用机制
• 串联质谱标签标记
• 液相色谱串联质谱

目的：采用串联质谱标签（TMT）标记联合液相色谱串联质谱（LC-MS/MS），从分子水平上探究茵芪三黄解毒汤（YQSH）抗肝纤维化的作用机制。方法：24只小鼠随机分为空白组、模型组、YQSH组、阳性药组，每组6只。除空白组外，其余组小鼠予10%四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射，建立肝纤维化模型，给药治疗后，摘眼球取血，取肝组织。观察各组小鼠肝功能、肝组织病理，提取空白组、模型组、YQSH组肝组织蛋白质进行蛋白质组学分析。结果：YQSH能显著改善肝纤维化模型小鼠的肝功能（P<0.01）和肝组织病理损害。肝组织中共鉴定出6 214个蛋白，与模型组比较，经YQSH干预后，共有127个差异蛋白，这些差异蛋白的生物过程主要富集于细胞外基质（ECM）、核细胞的前复制复合体组装、质膜修复等。分子功能主要涉及相同的蛋白结合、肌动蛋白绑定、肌动蛋白结合等。细胞组成主要定位于ECM、膜筏、应力纤维等。KEGG分析显示，YQSH的调控作用涉及PI3K-AKT、Rap1、NOD样受体等信号通路。PPI结果显示，白蛋白（Alb）、波形蛋白（Vim）、凝溶胶蛋白（GSN）、膜联蛋白A5(ANXA5)等可能是YQSH抗肝纤维化的核心作用靶点。结论：YQSH可能通过调控多个靶点蛋白及PI3K-AKT、Rap1、NOD样受体等重要信号通路抑制肝星状细胞活化、减少胶原纤维增生与沉积、减轻炎症反应，从而发挥抗肝纤维化作用。

• 单位
  中国科学院; 北京中医医院; 中国中医科学院广安门医院