大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定

作者：王耀; 李燕虹; 吴佳蓓; 邢云瑞; 曹金博; 陈秀金; 李兆周; 邓瑞广; 胡骁飞^*

来源：中国食品学报, 2020, 20(07): 216-221.

DOI：10.16429/j.1009-7848.2020.07.026

• 大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子
• 单克隆抗体
• 免疫学特性

为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子(BBI)单克隆抗体(mAb),以50μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性。选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到分泌BBI m Ab的稳定杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法制备BBI mAb并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明:1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为868.58 ng/mL。经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞,其中3B7-B10 mAb效价达到1∶4.096×105以上,亚型为IgG1型,IC50为83.07 ng/mL,具有亲和力较高且特异性强的优点,表明所制备的mAb免疫学特性良好,能够为建立大豆及其制品中BBI的免疫学检测方法提供良好的抗体基础。

• 单位
  食品与生物工程学院; 河南省农业科学院; 河南科技大学