靶向CD11b受体68Ga生物正交点击化学预定位分子探针的制备及结肠癌模型鼠显像

作者：张颖颖; 石岱; 徐展; 程远; 程登峰

来源：中华核医学与分子影像杂志, 2021, 41(10): 585-591.

• 抗原, CD11b
• 同位素标记
• 镓放射性同位素
• 点击化学
• 正电子发射断层显像术
• 结肠肿瘤
• 小鼠

目的制备一种针对整合素αM(CD11b)受体的预定位分子探针68Ga-1, 4, 7-三氮杂环壬烷-1, 4, 7-三乙酸-甘氨酸-精氨酸-谷氨酸-精氨酸-谷氨酸-十一聚乙二醇-1, 2, 4, 5-四嗪/CD11b抗体片段-反式-环辛烯[68Ga-NOTA-Polypeptide-PEG11-Tz/anti-CD11b-F(ab′)2-TCO], 并通过microPET显像探讨其作为CD11b受体靶向分子探针的可行性。方法采用免疫荧光法检测小鼠巨噬细胞RAW264.7膜表面CD11b受体的表达情况。将CD11b抗体与TCO连接, 并通过酶切法得到anti-CD11b-F(ab′)2-TCO。对配体NOTA-Polypeptide-PEG11-Tz进行68Ga标记, 检测标记率以及放化纯。进行预定位细胞结合实验, 建立CT26结肠癌荷瘤裸鼠模型, 进行预定位生物分布以及microPET显像实验。用免疫组织化学检查验证肿瘤微环境中CD11b+细胞的浸润情况。用单因素方差分析比较组间差异。结果免疫荧光检测结果显示RAW264.7细胞膜表面高度表达CD11b受体。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)验证成功合成anti-CD11b-F(ab′)2-TCO。放射性配体68Ga-NOTA-Polypeptide-PEG11-Tz标记率约为94.6%, 比活度为7.0～7.4 MBq/μg, 放化纯大于95%。预定位细胞结合实验证实该分子探针与CD11b受体有较好的靶向性。生物分布及显像结果示, 在预定位4、12以及24 h时间间隔下, 模型鼠肾放射性摄取较高, 表明分子探针通过肾代谢;肿瘤/肌肉比值为9.23±1.45、12.53±1.36和10.74±1.11(F=848.8, P<0.05);在预定位12 h注射放射性配体后1 h显像, 肿瘤与非靶器官对比度最佳:肿瘤标准摄取值(SUV)为0.67±0.12, 肌肉SUV为0.09±0.04。免疫组织化学结果示, CT26结肠癌微环境中浸润了大量CD11b+细胞。结论成功合成预定位分子探针68Ga-NOTA-Polypeptide-PEG11-Tz/anti-CD11b-F(ab′)2-TCO, 该标记物对CD11b阳性结肠癌具有较强的靶向能力, 有望用于靶向CD11b受体的体内示踪。

• 单位
  复旦大学; 复旦大学附属中山医院