靶向乙型肝炎表面抗原嵌合抗原受体T细胞对肝细胞癌杀伤作用的研究

作者：隋明昊; 王歈; 李崇辉; 卢实春^*

来源：中华肝胆外科杂志, 2022, 28(01).

• 癌, 肝细胞
• 乙型肝炎表面抗原
• T淋巴细胞
• 免疫治疗

目的分析靶向乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的嵌合抗原受体(CAR)-T细胞对表达HBsAg的肝癌细胞的杀伤作用。方法构建HBsAg-CAR基因, 通过慢病毒载体将其转导入T细胞(健康捐献者的血液中获取), 制备HBsAg-CAR-T细胞。制备CD19-CAR-T细胞作为Mock组, 未转导的T细胞为Untransduced组。上述三种效应细胞分别与肝癌细胞共同培养, 检测三组细胞对肝癌细胞的杀伤作用及抗肿瘤细胞因子(肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ、白细胞介素2等)释放水平。建立免疫缺陷NPG小鼠PLC/PRF/5肝癌皮下成瘤模型, 随机分组, 尾静脉注射HBsAg-CAR-T细胞(实验组, n=5)或未转导的T细胞(对照组, n=5), 注射后第15天测量肿瘤体积。结果体外培养过程中, HBsAg-CAR-T细胞具有较高的增殖能力及存活率, CAR的表达稳定。与表达HBsAg的肝癌细胞共培养后, HBsAg-CAR-T组释放的抗肿瘤细胞因子明显高于Mock组及Untransduced组, 差异均有统计学意义(均P<0.05);HBsAg-CAR-T组对HBsAg表达阳性的肝癌细胞的杀伤率明显高于Mock组及Untransduced组, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组NPG小鼠肿瘤体积为(250.8±62.8)mm3, 低于对照组小鼠肿瘤体积(757.5±102.6)mm3, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBsAg-CAR-T细胞能够特异性识别并杀伤HBsAg阳性肝癌细胞, 并释放高水平的抗肿瘤细胞因子。

• 单位
  解放军总医院; 中心实验室