IBDV强、弱毒VP2诱饵载体构建及在酵母双杂交系统中自激活作用的检测

作者：李铁强; 高玉龙; 高宏雷; 邓小芸; 王笑梅; 王立群

来源：中国预防兽医学报, 2008, (01): 1-4.

• IBDV
• 酵母双杂交
• 诱饵载体
• 自激活 IBDV
• yeast two-hybrid system
• bait vector
• autonomous reporter activation

采用Gateway技术将鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)Gx株和Gt株vp2基因分别克隆到载体pDEST-32构建诱饵载体,通过酶切和PCR鉴定并测序正确后,用醋酸锂法转化酵母菌株MaV203,通过缺陷型平板筛选和X-gal颜色筛选检测诱饵载体有无自激活作用。结果表明,成功构建了诱饵载体pDEST-32-Gxvp2和pDEST-32-Gtvp2,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活作用。为下一步利用酵母双杂交方法从鸡法氏囊B淋巴细胞和鸡胚成纤维细胞cDNA表达文库中筛选与强、弱毒VP2诱饵载体作用的分子奠定了基础。

• 单位
  东北农业大学; 生命科学学院; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室