检测猪乙型脑炎抗体胶体金免疫层析法的建立与初步应用

作者：田纯见; 贾坤; 林志雄; 何晓明; 罗琼; 罗长保; 鱼海琼; 陈茹; 彭运平; 吴晓薇

来源：广东畜牧兽医科技, 2013, 38(02): 21-25.

• 乙型脑炎
• 胶体金免疫层析
• 超速离心
• 抗体

利用蔗糖密度梯度超速离心浓缩纯化vero细胞培养SA14-14-2株猪乙脑病毒灭活抗原,进行胶体金点样和配比优化,制备GICA试纸条。结果最优浓缩样品配比构成是PBS 1.32 mL、灭活病毒液24 mL、30%蔗糖2.6 mL、55%蔗糖6.6 mL;用于胶体金偶联的抗原浓度约2.80 mg/mL。试纸条能明显区别阴阳性血清,阳性血清稀释1:256能显示条带,优化后灵敏度达到1:1024。与猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、Ⅱ型圆环病毒病阳性血清不发生交叉反应。用于检测2群免疫母猪抗体阳性率分别为86%和100%,说明疫苗免疫效果较好;检测未经免疫肉猪出现阳性结果,分别达到38%和24%,说明存在病毒隐形感染。

• 单位
  广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心; 华南农业大学; 广州万孚生物技术有限公司