ω-3多不饱和脂肪酸对树突状细胞生物物理学特性及迁移能力的影响

作者：王欢欢; 曾柱; 胡祖权; 宋萍萍^*

来源：医用生物力学, 2022, 37(03): 433-440.

DOI：10.16156/j.1004-7220.2022.03.008

• ω-3多不饱和脂肪酸
• 树突状细胞
• 生物物理学特性
• 细胞迁移
• 细胞骨架

目的 从生物物理学与免疫学交叉角度，分析二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)、二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)对鼠源树突状细胞(dendritic cells, DCs)生物物理学特性、细胞骨架及迁移能力的影响，探讨ω-3多不饱和脂肪酸(ω-3 polyunsaturated fatty acids,ω-3 PUFAs)对DCs免疫功能的影响及其潜在作用机制。方法 分离C57BL/6J小鼠骨髓来源单核细胞，经20 ng/mL重组鼠集落刺激因子(recombinant mouse granulocyte macrophage colony stimulating factor, rmGM-CSF)和10 ng/mL重组鼠白介素-4(recombinant mouse interleukin-4, rmIL-4)诱导分化为未成熟树突状细胞(immature dendritic cells, imDCs),第6天加入100 ng/mL脂多糖诱导为成熟树突状细胞(mature dendritic cells, mDCs),进一步对imDCs及mDCs进行形态学观察及CD11c阳性率分析；通过细胞增殖检测试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)及流式细胞仪检测不同浓度EPA和DHA(浓度均为0～60μmol/L)作用下DCs细胞活力及凋亡情况；在确定最佳作用浓度后分别通过荧光偏振法、细胞电泳法及浓度梯度法检测分析DCs的膜流动性、电泳迁移率(electrophoretic mobility, EPM)及渗透脆性变化，并用免疫荧光法检测其细胞骨架纤维状肌动蛋白(filamentous actin, F-actin)表达，最后利用Transwell系统检测DCs迁移能力。结果 imDCs及mDCs的CD11c阳性率均在80%左右；不同浓度EPA和DHA均呈剂量依赖性降低DCs细胞活力，但并没有诱导其凋亡。在50μmol/LEPA和DHA作用下，DCs生物物理学特性均发生改变，其中渗透脆性和EPM明显下降，膜流动性明显增大。DCs细胞骨架F-actin含量表达均明显上升，迁移率显著下降。结论 ω-3 PUFAs可能会通过改变DCs细胞骨架结构及生物物理学特性，抑制细胞迁移能力，进而影响其免疫功能。

• 单位
  贵州医科大学; 基础医学院