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摘要
将合成的来源于长孢洛德酵母菌(Lodderomyces elongisporus)属的氨基甲酸乙酯水解酶基因在大肠杆菌中实现异源表达，并进行纯化及其酶学性质研究。摇床培养后酶的比活力为4.52 U/mg，经过镍离子亲和层析柱纯化至显示单一条带后酶的比活力为9.86 U/mg。酶学性质研究表明，氨基甲酸乙酯水解酶的最适反应温度为30℃；最适pH值为7.0；金属离子Mg2+对该水解酶的酶活有微弱的促进作用，而Cu2+以及Fe3+对酶的活性有强烈的抑制作用；对低含量的乙醇溶液与NaCl溶液有一定的耐受性；并且该水解酶可以对不同底物的酰胺类化合物进行有效降解，以氨基甲酸乙酯(ethyl carbamate,EC)为底物进行反应时测得水解酶的动力学参数Km值为6.64 mmol/L，最大反应速率Vmax值为8.24μmol/min。
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