抗苹果斑点落叶病基因Mal d 1的克隆及功能鉴定

作者：宗泽冉; 田义; 张利义; 韩晓蕾; 张彩霞; 丛佩华

来源：园艺学报, 2017, 44(02): 343-354.

DOI：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0654

• 苹果
• Mal d 1
• 表达分析
• 转基因
• 斑点落叶病菌

以苹果叶片总RNA为模板,通过克隆获得抗苹果斑点落叶病基因Mal d 1。Mal d 1开放阅读框长度为480 bp,编码159个氨基酸残基,包含2个外显子和1个内含子。蛋白结构分析显示,Mal d 1蛋白包含bet v 1-like结构域。荧光定量PCR分析结果表明,Mal d 1在苹果叶、花、果皮、果肉中均有表达,但各器官中表达水平存在差异;在不同发育时期的果皮中都有表达,表达水平随时间呈现先上升后下降的趋势;在抗性品种叶片中表达水平较高;在叶片人工接种病菌条件下表达量随时间的延长明显高于对照组。利用PRI101-AN载体和农杆菌介导的遗传转化方法转化苹果愈伤组织,转基因愈伤组织的抗病鉴定结果显示,Mal d 1过量表达增强愈伤组织对苹果斑点落叶病的抗性。

• 单位
  中国农业科学院果树研究所; 农业部