周期性张力对骨髓间充质干细胞分化的血管平滑肌细胞的表型调节

作者：游成东; 李茂; 黄文

来源：中华实验外科杂志, 2015, 32(02): 250-253.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2015.02.013

• 周期性张力
• 转录生长因子-β1
• 骨髓间充质干细胞
• 血管平滑肌细胞
• 表型

目的探讨周期性张力对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导分化的血管平滑肌细胞(VSMCs)的表型的调节机制。方法原代全骨髓法培养大鼠BMSCs,流式细胞术鉴定细胞。作成脂、成骨、成平滑肌细胞方向诱导,验证BMSCs的多向分化潜能。将细胞分为4组:A组用含10μg/L转化生长因子-β1(TGF-β1)的完全培养基培养,B组用幅度10%、频率1 Hz周期性张力诱导,C组采用TGF-β1+周期性张力联合诱导,D组用含10%胎牛血清(FBS)的DMEM/F12培养基培养作对照。3 d后观察诱导后的细胞形态,并行反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肌动蛋白(α-actin)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)、钙调节蛋白1(calponinl)、钙调节蛋白3(calponin3)的mRNA表达水平,Western blot观察细胞内α-actin、SM-MHC、calponinl、calponin3蛋白表达水平。结果经流式细胞术鉴定,所培养细胞为BMSCs。诱导3 d后,A、B、c 3组的VSMC标志物均较D组明显升高,以SM-MHC和calponin3增加为主。A组(0.919 2±0.028 1)较B组(0.823 6±0.024 6)的SM-MHC蛋白表达水平高,但低于C组(1.043 1±0.090 7),其差异均有统计学意义(P<0.05)。C组中calponin3 mRNA表达量比蛋白表达量变化更明显,而calponinl蛋白表达量和mRNA表达量同步增高。结论周期性张力能够诱导BMSCs分化为VSMCs,对分化的VSMCs的表型调节还需要细胞因子的参与。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院