产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌bla_(CTX-M)基因型及耐药性检测

作者：黄斌; 张盛斌; 卢东生; 林茂煌; 赵淑灿; 谢灿茂

来源：临床医学, 2010, 30(08): 1-4.

• 变性高效液相色谱
• 超广谱β-内酰胺酶
• CTX-M型质粒
• 基因型
• 耐药性

目的运用变性高效液相色谱(DHPLC)技术对已经确认产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的临床分离株CTX-M型质粒进行基因分型,探讨其敏感性和特异性,建立一种快速检测CTX-M型ESBLs基因型的新方法。同时了解产CTX-M酶菌的耐药情况。方法利用逆转录聚合酶链反应(PCR)技术从大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中扩增出CTX-M型质粒的编码序列,扩增产物运用DHPLC技术进行分析和测序确定其基因突变的类型,最后通过对比两者结果后确定其基因型;采用K-B法进行药敏试验。结果从34株临床分离株中扩增出35份CTX-M型质粒的编码序列(其中1株同时扩增到2份CTX-M型编码序列)。对比DHPLC和测序结果,洗脱峰型一致的样本均为同一基因亚型。产CTX-M酶菌对亚胺培南或美洛培南高度敏感,对氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛钠、哌拉西林高度耐药。结论 DHPLC准确性较高,具有简便快捷、经济等特点,可应用于CTX-M型ESBLs的基因型检测;产CTX-M酶菌耐药表型呈多样性,亚胺培南或美洛培南是临床治疗产CTX-M酶菌感染的首选药物。

• 单位
  中山大学附属第一医院; 汕头市中心医院