小鼠PD-L1真核表达载体构建及其在树突状细胞中的表达

作者：谭善峰^*; 何相飞; 王健明; 王凯; 宋斌; 韦自卫; 陶昱成; 李文智^*

来源：泌尿外科杂志(电子版), 2020, 12(04): 10-15.

• PD-L1
• 克隆
• 载体构建
• 树突状细胞

目的克隆小鼠PD-L1(mouse PD-L1,m PD-L1)全长cDNA,构建其真核表达载体,并验证其在小鼠骨髓源性树突状细胞(dendritic cells,DC)中的表达。方法采用RT-PCR和TA克隆技术,从小鼠CT-26细胞中扩增mPD-L1全长cDNA,克隆到T载体中,再亚克隆至pTracer-CMV2载体中。以改良脂质体法将构建好的重组质粒转染至小鼠DC,通过流式细胞术检测mPD-L1蛋白及GFP表达。结果测序证实所得的mPD-L1cDNA序列与其在GenBank中的序列完全一致。mPD-L1真核表达载体转染小鼠DC后,能稳定表达mPD-L1蛋白。结论成功克隆了mPD-L1基因,构建其真核表达载体,并证明能有效表达于DC中。

• 单位
  临沂市人民医院; 上海交通大学医学院附属第九人民医院