摘要

目的探讨当归四逆汤含药血清对高糖培养SD大鼠背根神经元线粒体分裂及Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶(ROCK)通路的影响。方法各取6只SD大鼠,分别灌胃生理盐水、当归四逆汤后颈动脉取血分别制备正常血清及含药血清。取正常SD大鼠两侧背根神经元进行体外培养,随机分为对照组、高糖组、当归四逆汤组,高糖组和当归四逆汤组细胞以高糖处理,当归四逆汤组细胞再以10%的含药血清处理,对照组细胞正常培养。经正常血清、含药血清处理后,采用CCK-8实验检测各组细胞活力;采用试剂盒测定各组细胞活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位及释放乳酸脱氢酶(LDH)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-18(IL-18)水平;采用免疫印迹实验检测各组细胞线粒体分裂蛋白包括动力相关蛋白1(Drp1)与分裂蛋白1(Fis1)、融合蛋白即丝裂原融合蛋白1(MFN1)与丝裂原融合蛋白2(MFN2)、RhoA/ROCK通路蛋白RhoA与ROCK表达。结果与对照组比较,高糖组背根神经元ROS水平及释放的LDH、IL-6、IL-18水平,细胞中Drp1、Fis1、RhoA及ROCK蛋白表达升高,细胞活力、线粒体膜电位、细胞中MFN1及MFN2蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与高糖组比较,当归四逆汤组背根神经元ROS水平及释放的LDH、IL-6、IL-18水平,细胞中Drp1、Fis1、RhoA及ROCK蛋白表达降低,细胞活力、线粒体膜电位、细胞中MFN1及MFN2蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论当归四逆汤含药血清可下调RhoA/ROCK通路蛋白表达,抑制高糖诱导的ROS和炎性因子表达,减轻炎症反应,减弱线粒体分裂,缓解SD大鼠背根神经元损伤。

  • 单位
    湖北省中医药研究院; 湖北省中医院