解毒通络生津方对干燥综合征NOD小鼠PD-1/PD-L1信号通路的影响

作者：程丹丹; 李永明; 薛鸾^*

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2022, 24(09): 3580-3588.

• 解毒通络生津方
• 干燥综合征
• PD-1/PD-L1
• Treg细胞
• Foxp3
• NOD小鼠

目的 观察解毒通络生津方对干燥综合征(SS)模型NOD小鼠PD-1/PD-L1通路的影响，探讨其作用机制。方法 将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为3组，即模型组(Model)、解毒通络生津方组(TCM)、解毒通络生津方加抗PD-L1单抗阻断组(TCM+α-PD-L1)，每组8只。另选8只8周龄雌性ICR小鼠作为正常对照组(Ctrl)。12周龄时开始中药干预，TCM组按照每天24.4 g·kg-1解毒通络生津方灌胃，TCM+α-PD-L1组在每天给予24.4 g·kg-1解毒通络生津方灌胃的基础上，腹腔注射抗PD-L1抗体，1周2次，每次100μg,Ctrl组和Model组给予同等剂量的生理盐水灌胃，实验期间记录各组小鼠第9、12、16、20周龄时的日均饮水量，干预8周后，小鼠统一麻醉下摘取颌下腺。HE染色观察各组小鼠颌下腺中炎症细胞浸润情况；流式细胞仪检测小鼠颌下腺CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg细胞的表达；Western Blot检测小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达。结果 随着小鼠周龄的增长，Ctrl组小鼠日均饮水量基本不变，Model组小鼠的日均饮水量有明显上升趋势，TCM组小鼠日均饮水量下降，TCM+α-PD-L1组小鼠日均饮水量上升；与Model组比较，TCM组炎症细胞浸润灶明显减少(P<0.001)；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组炎症细胞浸润增多(P<0.001)；与Ctrl组比较，Model组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg的表达降低(P<0.001)，与Model组比较，TCM组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg表达升高(P<0.01)；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组CD4+CD25+Foxp3+PD-1+Treg的表达降低(P<0.01)；与Ctrl组比较，Model组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低(P<0.01)；与Model组比较，TCM组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达升高(P<0.01)；与TCM组比较，TCM+α-PD-L1组小鼠颌下腺中PD-1、PD-L1和Foxp3蛋白的表达降低(P<0.001)。结论 解毒通络生津方可能通过PD-1/PD-L1信号通路促进SS模型小鼠Treg细胞活化，上调Foxp3的表达，增强Treg细胞抑制免疫炎症的作用，PD-1/PD-L1可能是解毒通络生津方治疗SS的一个作用靶点。

• 单位
  上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院