牛朊蛋白27-30基因的克隆与表达

作者：路伟; 张鹏; 张杰; 刘永生; 卫广森; 陈豪泰; 姜海霞; 朱小玲

来源：中国预防兽医学报, 2007, 29(04): 277-281.

DOI：10.3969/j.issn.1008-0589.2007.04.008

• 牛PrP~(27-30)基因
• 克隆
• 表达 bovine PrP27~(27-30) gene
• cloning
• expression

利用PCR技术,从含有牛朊蛋白(Prion protein,PrP)基因Prnp的开放阅读框的克隆质粒BoPrnp-T中扩增出约420 bp的目的基因(PrP~(27-30)基因)。将PrP~(27-30)基因和载体pPIC9K分别用限制性核酸内切酶EcoR I和Not I进行双酶切,T4 DNA连接酶作用后,转化至E.coli JM109中,构建重组表达载体pPIC9K-boPrP~(27-30) pPIC9K-boPrP~(27-30)经限制性核酸内切酶Sal I线性化后电转至毕赤酵母GS115中,经G418筛选后得到高拷贝的重组菌株GS115/pPIC9K-boPrP~(27-30)。G...

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 甘肃农业大学; 农业部; 辽宁省动物疫病预防控制中心; 沈阳农业大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所