全悬浮培养LMH细胞制备FAdV-4灭活疫苗的研究

作者：秦红刚; 韩兴; 秦伟; 李晶梅; 熊亮; 余继钦; 谢红玲; 漆世华; 李凌峰; 石宝兰^*

来源：中国兽药杂志, 2023, 57(09): 7-13.

• LMH细胞
• 悬浮培养
• FAdV-4

通过对LMH细胞进行驯化，获得一株可全悬浮培养的LMH细胞，命名为LMH-S。此细胞可适应无血清、高密度悬浮培养，以初始细胞密度0.5×106/mL～1×106/mL接种，细胞密度最高达6×106/mL。研究确定生物反应器悬浮培养LMH-S细胞制备FAdV-4抗原的最优参数为：接毒时细胞密度2×106/mL～3×106/mL、接毒量0.1MOI～1MOI、接毒后48 h～72 h收毒，所获抗原病毒含量不低于109.25TCID50/mL。试验鸡分别免疫0.02 mL、0.05 mL、0.1 mL、0.3 mL疫苗，攻毒保护率分别为9/10、10/10、10/10、10/10,表明疫苗有效性良好。本试验成功建立了LMH全悬浮培养细胞株，确定了FAdV-4抗原的生物反应器悬浮培养工艺，验证了悬浮培养抗原的免疫原性，为高效FAdV-4灭活疫苗的研制奠定了基础。