梅毒螺旋体特异性抗原TpN47基因片段的克隆与表达

作者：王宪灵; 张卫军; 邹全明; 曾明; 罗萍; 郭刚

来源：中国生物制品学杂志, 2008, (04): 281-284.

• 梅毒密螺旋体
• 特异性抗原
• 基因克隆
• 表达 Treponema pallidum
• Lipoprotein
• Gene cloning
• Expression

目的在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体(Tp)TpN47(68~410 aa)重组蛋白。方法采用PCR法从Tp全基因组中扩增TpN47(202~1230 bp)片段,T-A克隆后构建原核表达质粒pET-22 b(+)-TpN47,经酶切鉴定后转化EcoliBL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经Ni2+亲和层析柱纯化,Western blot鉴定其免疫反应性。结果PCR法扩增出约1 000 bp的目的片段,原核表达质粒pET-22 b(+)-TpN47经酶切鉴定正确,表达的蛋白约占菌体总蛋白的43%,相对分子质量约为39 000,以包涵体形式存在。经纯化后蛋白纯度达95%以上,Western...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学; 中国食品药品检定研究院