Ki67法检测间充质干细胞对淋巴细胞增殖抑制能力

作者：韩莹; 时玉峥; 魏训东; 曹利人^*

来源：药物评价研究, 2022, 45(04): 673-679.

• Ki67
• 羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)
• 间充质干细胞(MSCs)
• 外周血单个核细胞(PBMC)
• 免疫调控
• 增殖

目的 对比Ki67法与羧基荧光素乙酰乙酸（carboxyfluoreseein di-acetate succinimidyl ester,CFSE）法检测间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSCs）对淋巴细胞的增殖抑制能力，开发MSCs免疫调控功能评价的新方法。方法 选取5批脐带来源的MSCs，流式细胞术进行表面标志物（阳性CD73/CD90/CD105/CD44、阴性CD34/CD45/CD14/CD19）检测；试剂盒诱导后染色进行成脂、成骨、成软骨三系分化能力检测；流式细胞术进行增殖指数检测；CCK8法进行群体倍增时间检测；生物学有效性检测合格后与相同供者来源的外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）进行共培养，分别用CFSE法与Ki67法检测MSCs对PBMC的增殖抑制率。结果 制备的MSCs生长状态良好，CD73/CD90/CD105/CD44表达率均≥98%,CD34/CD45/CD14/CD19表达率均≤3%，成脂、成骨、成软骨三系分化能力良好，增殖指数为35.8±9.9，倍增时间为（19.1±1.2） h，增殖情况良好。CFSE法检测5批MSCs对PBMC的增殖抑制率为（91.20±0.70）%,Ki67法检测5批MSCs对PBMC的增殖抑制率为（89.99±1.45）%,2种方法比较，差异无统计学意义。结论 Ki67法可作为评价MSCs免疫调控功能的新方法，有效避免传统方法在检测过程中的局限性。

• 单位
  北京医院