银杏内酯B对阿霉素致心肌细胞损伤的干预作用

作者：陈弢; 郜俊清; 于宏梅; 赵德强^*

来源：广州中医药大学学报, 2018, 35(05): 893-899.

DOI：10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2018.05.025

• 银杏叶
• 银杏内酯B
• 阿霉素
• 凋亡
• 钙网蛋白
• 心肌细胞损伤

【目的】探讨银杏内酯B对阿霉素损伤心肌细胞的干预作用及相关机制。【方法】复制体外H9C2大鼠心肌细胞阿霉素损伤模型,以钙网蛋白沉默RNA(CRTsiRNA)干扰沉默钙网蛋白(CRT)的表达,再应用银杏内酯B对其进行干预。本实验设常规组、CRT组,每组再设银杏内酯B组、银杏内酯B+阿霉素组、阿霉素组及空白组等4个亚组。采用流式细胞技术检测各组大鼠心肌细胞的凋亡率,分别采用实时定量PCR(q PCR)与蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌细胞凋亡信号通路中c-Jun氨基末端激酶(JNK)、caspase3、caspase12、CRT mRNA及蛋白表达水平,采用电镜技术观察心肌细胞超微结构。【结果】常规组中,银杏内酯B+阿霉素组细胞凋亡率为(24.87±9.05)%,阿霉素组凋亡率为(46.23±4.98)%,空白组凋亡率为(2.43±0.35)%,差异有统计学意义(P<0.05);银杏内酯B能够显著下调阿霉素损伤的H9C2中升高的JNK、caspase3、caspase12蛋白及mRNA表达水平,差异有统计学意义(P<0.05)。CRTsiRNA干扰后,阿霉素组凋亡率为(53.17±9.81)%,空白组凋亡率为(6.00±2.27)%,2者比较,差异有统计学意义(P<0.05),银杏内酯B+阿霉素组凋亡率为(53.17±9.99)%,与阿霉素组无显著性差异(P>0.05)。经CRTsiRNA干扰的细胞中JNK、caspase3、caspase12 mRNA及蛋白表达水平较对应的未干扰组均显著升高,而银杏内酯B并不能下调阿霉素诱导的心肌细胞中上述指标的升高。常规组中,阿霉素组CRT mRNA及蛋白表达水平下降(P<0.05),而经银杏内酯B干预后,CRT mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05);经过CRTsiRNA干扰后,各组CRT mRNA及蛋白表达水平较相应常规组显著下降(P<0.05)。透射电镜观察结果显示,银杏内酯B可以抑制阿霉素对心肌细胞的损伤,但是该作用经CRTsiRNA干扰后表现并不明显。【结论】银杏内酯B可能通过上调内质网钙网蛋白的表达,抑制内质网应激诱导的凋亡途径,从而减轻阿霉素引起的心肌细胞损伤。

• 单位
  上海市普陀区中心医院