透射电镜制样过程中漂洗时间对神经组织超微结构的影响

作者：王萌; 李婷; 董红燕^*

来源：神经解剖学杂志, 2018, 34(04): 515-518.

DOI：10.16557/j.cnki.1000-7547.2018.04.017

• 透射电镜
• 超微结构
• 漂洗
• 脊髓白质

目的:观察透射电镜制样过程中不同漂洗时间对神经组织超微结构的影响,以确定最佳漂洗时间。方法:12只健康C57/BL6小鼠随机分成四组,每组3只。将小鼠断颈处死,分别切取脊髓白质组织,2.5%戊二醛+4%多聚甲醛固定4 h后进行漂洗,Ⅰ组:1 min之内连续漂洗3遍;Ⅱ组:10 min/次,共3次;Ⅲ组:10 min/次,共12次;Ⅳ组:10 min/次,共12次,4℃过夜。再依次进行透射电镜生物样品常规制样程序。结果:透射电镜镜下观察示Ⅰ组髓鞘、线粒体、突触小泡的结构保存好,但样本背景遍布黑色污染颗粒;Ⅱ组组织结构保存好,髓鞘及线粒体的磷脂层清晰可见,突触小泡膜结构完整,样本背景清晰洁净;Ⅲ组组织结构保存较好,仅少部分膜结构有融合,样本背景清晰洁净;Ⅳ组结构保存较差,膜结构基本自溶,样本背景遍布黑色污染颗粒。结论:透射电镜制样过程中样本超微结构的保存受漂洗时间的影响,前固定后最佳漂洗时间为30 min。

• 单位
  徐州医科大学