胸腺上皮细胞特异性敲除GSK-3β基因小鼠模型的鉴定及免疫学特征观察

作者：李喜; 曾艳; 陈昌蓉; 李论; 余祥; 周永芹; 王德成; 邓亚光; 宋银宏

来源：中国实验动物学报, 2023, 31(03): 279-286.

DOI：10.3969/j.issn.1005-4847.2023.03.001

• 胸腺上皮细胞
• 特异性敲除
• GSK-3β
• 免疫学特征

目的 构建并鉴定胸腺上皮细胞（thymic epithelial cells, TECs）特异性敲除GSK-3β基因小鼠模型，评价其免疫学特征。方法 采用小鼠胚胎干细胞（ES细胞，embryonic stem cells）打靶基因敲除技术，得到F0代的GSK-3βflox/flox(GSK-3βf/f)小鼠；再采用Cre-LoxP系统进行小鼠的繁殖；PCR鉴定，筛选出基因型为GSK-3βf/fFoxN1-Cre+/-(GSK-3β-/-)小鼠，即为在TECs特异性敲除GSK-3β基因的小鼠。观察基因敲除鼠的一般生物学特征、繁殖能力和子代存活率。应用HE染色、流式细胞术及免疫荧光技术，比较基因敲除鼠和野生型小鼠免疫器官结构、胸腺、脾及外周血中免疫细胞比例及增殖能力差异。结果 成功构建TECs特异性敲除GSK-3β基因小鼠模型。与野生型（wild type, WT）小鼠相比，GSK-3β-/-小鼠一般生物学特征无明显差异，子代存活率> 90%;衰老进程中GSK-3β-/-小鼠胸腺比WT小鼠体积大，胸腺指数高，胸腺细胞数量多；脾中的初始T细胞及近期迁移细胞数量也显著多于WT小鼠。结论 成功构建了TECs特异性敲除GSK-3β基因小鼠模型。为研究GSK-3β基因在TECs的功能和作用机制提供了很好的研究模型。

• 单位
  三峡大学; 基础医学院