BAFF蛋白特异性核酸适配体的筛选与鉴定

作者：郭娜燕; 陈文标; 陈荫楠; 陈榕生^*; 林俊生^*

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2020, 36(12): 1498-1507.

DOI：10.13865/j.cnki.cjbmb.2020.11.1337

• B细胞活化因子
• 核酸适配体
• 高通量测序
• 指数富集配体系统进化

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是我国最常见的自身免疫性疾病。B细胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)是SLE治疗和检测的重要靶标。发展针对BAFF的经济高效的新型分子识别元件具有重要意义。利用指数富集配体系统进化(systematic evolution of ligands exponential enrichment,SELEX)体外筛选技术,从78 nt的单链DNA随机文库中筛选BAFF蛋白的核酸适配体。经过10轮筛选,高通量测序分析后,采用斑点印迹、Eastern印迹、酶联寡核苷酸吸附实验(enzyme-linked oligonucleotide assay,ELONA)检测,核酸适配体Apt 7和Apt 12可特异性识别BAFF蛋白,解离常数分别为241.00±19.75 nmol/L和413.51±46.94 nmol/L。经分子对接分析,将核酸适配体Apt 7截短为Apt 7～1,解离常数为192.10±28.61 nmol/L。联合核酸适配体Apt 7～1与BAFF抗体建立夹心ELONA法检测BAFF蛋白,检测限为0.227 nmol/L。该研究为BAFF蛋白检测和拮抗剂研究提供了新的分子识别元件。

• 单位
  泉州医学高等专科学校; 华侨大学