基于酵母双杂交的微囊藻毒素检测系统初探

作者：潘晓; 沈萍萍; 华子春

来源：水生生物学报, 2008, 32(02): 201-206.

DOI：10.3321/j.issn:1000-3207.2008.02.010

• 微囊藻毒素
• 酵母双杂交
• ONPG(邻硝基苯--βD-半乳吡喃糖苷)
• -βGal(β-半乳糖苷酶) Microcystins
• Yeast two-hybrid
• ONPG
• β-Gal

微囊藻毒素是由淡水微囊藻产生的次生代谢物,结构为环状七肽,分子量约1000Da,对生物机体具有多种毒理作用,是一类较强的肿瘤促进剂,目前没有比较简单便宜的藻毒素检测方法,本文探索建立利用酵母双杂交系统进行藻毒素检测的方法。前期实验已用噬菌体表面展示肽库技术从随机12和7肽库中筛选获得若干与藻毒素有相互作用的多肽。本文分别挑选其中亲和力较高的3个多肽,构建到酵母双杂交系统中,将不同的肽段分别融合在含有Ac-tive Domain和Binding Domain的表达载体中,共转化酵母菌株AH109,然后测定β-半乳糖苷酶活性来反映下游报告基因半乳糖苷酶的表达情况,从而通过反映培养基里面是否含有藻毒...

• 单位
  医药生物技术国家重点实验室; 南京大学