普通多重PCR和多重实时荧光PCR在检测致泻性大肠埃希氏菌的效果评价分析

作者：朱华

来源：医药论坛杂志, 2021, 42(12): 71-73.

• 普通多重PCR
• 多重实时荧光PCR
• 大肠埃希氏菌
• 分析

目的评价普通多重PCR和多重实时荧光PCR方法在检测致泻性大肠埃希氏菌的检测效果。方法对样本进行培养,提取核酸,用普通多重PCR扩增,用毛细管凝胶电泳法检测,同时用实时荧光多重PCR进行检测。结果毛细管凝胶电泳结果显示出一号质控品5个菌落均检测出了uidA(1487bp)基因所对应的条带,另外还具有elt(655bp)、estIa(157bp)、estIb(171bp)和astA(102bp)毒力基因所对应的条带;二号质控品的5个菌落均检测出了uidA基因所对应的条带,另外还具有invE(766bp)毒力基因所对应的条带。实时荧光PCR结果显示一号质控品A管的uidA(ROX)和B管的estIa+b(FAM)、elt(ROX)、astA+pic(CY5)等毒力基因均出现了典型的扩增曲线,二号质控品的A管的uidA(ROX)和ipaH(CY5)毒力基因均出现了典型的扩增曲线。结论使用普通多重PCR方法和多重实时荧光PCR方法对两份质控品的检测结果高度一致。验证了新国标中的致泻性大肠埃希氏菌的PCR确认方法的可行性。