PRRSV 2b蛋白互作宿主细胞蛋白的筛选

作者:崔一龙; 邓守全; 杨达汉; 薛江东; 马德慧
来源:中国生物制品学杂志, 2019, (04): 403-407.
DOI:10.13200/j.cnki.cjb.002560

摘要

目的 通过酵母双杂交筛选技术从猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)c DNA文库中筛选与猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)2b蛋白互作的宿主细胞蛋白。方法 将PRRSV 2b基因扩增产物克隆至p GBKT7质粒上,构建重组钓饵载体p GBKT7-2b,转化至Y2H Gold酵母感受态中制备钓饵菌株后,进行自激活和毒性检测;将PAM c DNA文库菌株与钓饵菌株进行杂交融合,经DDO/X/A平板筛选后,对筛选的菌株进行PCR鉴定及测序分析。结果 ...

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