柿叶提取物通过TLR4/NLRP3炎症信号通路和肠道菌群治疗溃疡性结肠炎的机制研究

作者：张雪侠; 刘方洲; 梁瑞峰; 周敏; 刘长河; 李华妮; 郭晓燕

来源：中国新药杂志, 2023, 32(15): 1561-1569.

• 柿叶
• 溃疡性结肠炎
• TLR4/NLRP3信号通路
• 肠道菌群

目的:鉴定柿叶提取物中黄酮类成分，从TLR4/NLRP3炎症信号通路和肠道菌群角度探究对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的作用机制。方法:利用HPLC法对柿叶(persimmon leaf, PL)提取物中5个黄酮类成分进行含量测定。采用3%葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)构建小鼠UC模型。每天记录小鼠体质量和饮水量。Elisa法检测血清IL-6,TNF-α,IL-1β,IL-10水平，HE染色观察结肠组织的变化，Western blot法检测结肠组织中TLR4,IL-1β,NF-κB p65和NLRP3蛋白的表达，16S rDNA扩增子测序法检测粪便中肠道菌群的变化。结果:与Control组相比，DSS组小鼠体质量、结肠长度、IL-10水平显著降低(P<0.01);疾病活动指数和IL-6,TNF-α,L-1β水平升高(P<0.01)。与DSS组相比，给药组小鼠体质量下降缓慢，结肠长度延长，疾病活动指数降低；IL-6,TNF-α,IL-1β水平显著降低(P<0.01),IL-10水平显著升高(P<0.01);TLR4/NLRP3相关蛋白表达显著上升(P<0.01);PL给药组TLR4,IL-1β,NF-κB p65,NLRP3蛋白表达降低(P<0.01);16S rDNA扩增子测序法结果显示鼠乳杆菌、约氏乳杆菌、罗姆布茨菌、艾克曼菌种均有增加的趋势。病理结果显示DSS组小鼠可见结肠组织有严重的黏膜溃疡、隐窝丧失、炎性细胞浸润和杯状细胞耗竭，给药后小鼠结肠组织病变得到改善。HPLC法分离度好、准确度高。结论:柿叶提取物对DSS诱导的UC小鼠肠道损伤有保护作用，可能与抑制TLR4/NLRP3炎症信号通路降低炎症反应从而改善肠道微环境有关。

• 单位
  郑州大学; 河南省中医药研究院