富血小板血浆对人脐带间充质干细胞增殖及成骨分化的影响

作者：林颢; 李鹏; 孙杰聪; 曾荣; 楚佳奇

来源：广东医学, 2016, 37(09): 1274-1277.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.20160503.004

• 富血小板血浆
• 脐带间充质干细胞
• 细胞增殖
• 成骨分化

目的探讨不同浓度富血小板血浆(PRP)对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)的增殖及成骨分化影响。方法提取脐带血PRP,ELISA试剂盒测定PRP中转化生长因子-β1(TGF-β1)浓度,并将其作为PRP生长因子含量的衡量标准,分别以含不同浓度TGF-β1的PRP培养hUC-MSCs,CCK-8法检测细胞增殖效率。将P5代hUC-MSCs接种于6孔板,分为4组:对照组只添加完全培养基培养,PRP组添加TGF-β1为750 pg/mL的PRP培养,成骨诱导组添加成骨诱导培养基培养,PRP+成骨诱导组添加TGF-β1为750 pg/mL的PRP和成骨诱导培养基培养。Real-time PCR检测hUC-MSCs成骨标志基因(OPN、RUNX2、ALP)的相对表达量。结果细胞培养至第5天时,含TGF-β1浓度为750、1 000、2 000 pg/mL的PRP对细胞增殖促进作用显著。此外,成骨诱导过程中,添加PRP对细胞形态有不同程度影响,相对于成骨诱导组,PRP+成骨诱导组细胞第14天时已有明显的钙沉积。Real-time PCR结果显示,对照组细胞在各时间点成骨标志基因只有微量表达,且无明显变化。其余3组细胞随培养时间增加,成骨标志基因表达均有不同程度上调,其中,PRP组高于对照组(P<0.05),成骨诱导组高于PRP组(P<0.05),PRP+成骨诱导组高于成骨诱导组(P<0.05)。结论体外培养时PRP可促进hUCMSCs增殖及成骨分化,PRP中TGF-β1最佳浓度为750 pg/mL。

• 单位
  广东医学院附属医院