树突状细胞调控急性肺损伤早期炎症反应机制的研究

作者：董亮; 徐静媛; 刘军; 刘玲; 杨毅; 邱海波

来源：中国急救医学, 2016, 36(02): 171-175+194.

DOI：10.3969/j.issn.1002-1949.2016.02.016

• 急性肺损伤(ALI)
• 常规树突状细胞(cDCs)
• 炎症反应
• 中性粒细胞浸润
• Th免疫反应
• 发病机制

目的 明确肺常规树突状细胞(cDCs)对急性肺损伤(ALI)早期炎症反应和肺损伤的影响,以及其具体的作用机制。方法 C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(A组)、ALI组(B组)、FLT3L预处理组(C组)、来他替尼预处理组(D组)和DMSO对照组(E组),分别给予FLT3L、来他替尼预处理5 d后复制ALI模型,6 h及24 h后处死小鼠留取肺组织,采用流式细胞术检测CD11c+CD11b+双阳性细胞比例,评价肺cDCs的数量;检测肺cDCs的MHCⅡ及CD80表达比例。评价肺cDCs的成熟程度;ELISA检测IL-6、TNF-α评价,肺部炎症反应的强度;计算肺湿质量/体质量比(LWw/BW),评价肺水肿程度;肺组织HE染色行组织病理学检查评价肺损伤程度;比色法检测肺髓过氧化物酶(MPO)活性,评价中性粒细胞的浸润;qRT-PCR检测转录因子T-bet及GATA-3 mRNA的表达比例,评价辅助性T细胞Th1/Th2亚群漂移;ELISA检测IFN-γ及IL-4表达,评价Th1/Th2细胞因子的平衡。结果 肺cDCs聚集及成熟程度高峰出现于ALI成模后6 h。FLT3L预处理显著增加肺cDCs的聚集和成熟程度,肺cDCs数量(4.98±1.96),MHCⅡ分子表达(71.52±6.75),CD80表达(2.18±0.85),上调肺部炎症反应并加重肺损伤,同时肺MPO活性(8.58±0.87)、T-bet/GATA-3的表达比例(5.98±0.94)和肺IFN-γ水平(65.80±6.23)均显著上升。来他替尼预处理显著抑制肺cDCs的聚集和分化成熟程度,肺cDCs数量(1.44±0.11),MHCⅡ分子表达(37.54±5.86),CP80表达(1.33±1.10),下调肺部炎症反应并减轻肺损伤,同时肺MPO活性(4.43±O.29)、T-beb/GATA-3的表达比例(1.96±0.10)和肺IFN-γ水平(38.72±5.85)均显著下降。结论 肺cDCs可通过调节肺中性粒细胞的浸润和Th1/Th2免疫反应的平衡参与启动和调节ALI早期炎症反应和肺损伤。

• 单位
  无锡市人民医院; 东南大学附属中大医院