梅毒螺旋体膜蛋白Tpp17调节血管内皮屏障通透性的机制研究

作者：张瑞丽; 王千秋^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2015, 35(07): 506-510.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.07.006

• 梅毒
• 梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp17
• 人脐静脉内皮细胞
• 内皮屏障

目的研究梅毒螺旋体膜重组蛋白Tpp17(rTpp17)对血管内皮屏障的调节作用, 探讨膜蛋白Tpp17在梅毒免疫病理学发病机制中的作用。方法利用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)构建体外细胞单层模型, 将采用基因工程技术重组合成的rTpp17刺激HUVEC单层模型, ELISA检测Transwell小室的下室培养基中辣根过氧化物酶(HRP)流量;Cell-ELISA检测细胞表面VE-钙黏蛋白(VE-cadherin)表达水平;rTpp17预处理HUVEC单层模型, 加入Calcein-AM标记的THP-1细胞共培养, 荧光倒置显微镜下计数THP-1细胞穿过HUVEC单层的迁移率;将HUVEC接种激光共聚焦专用培养皿, rTpp17处理后, 加入荧光染料罗丹明-鬼笔环肽工作液, 共聚焦显微镜下观察细胞骨架蛋白F-actin排列变化。结果 rTpp17可提高HUVEC单层模型通透性及下调细胞膜VE-cadherin的表达水平;促进THP-1细胞穿越HUVEC单层的迁移率, 与阴性对照组比较, 差异有统计学意义(P<0.05); rTpp17可促进细胞骨架蛋白F-actin重排。结论梅毒螺旋体膜蛋白Tpp17可提高血管内皮屏障通透性, 下调血管内皮细胞VE-cadherin的膜表达水平, 促进细胞骨架蛋白F-actin重排及单核-巨噬细胞穿过血管内皮细胞单层, 可能在梅毒的免疫病理学发病机制中起重要作用。

• 单位
  南京医科大学; 无锡市第二人民医院; 中国医学科学院北京协和医学院