微小RNA-135a-5p对胰腺癌增殖、迁移和耐药的影响

作者：宋仕军; 李忠廉^*

来源：中华实验外科杂志, 2019, 36(11).

• 微小RNA-135a-5p
• 支链氨基酸转氨酶1
• 胰腺癌
• 耐药

目的观察微小RNA(miRNA, miR)-135a-5p对胰腺癌细胞增殖、迁移和对顺铂化疗敏感性的影响。方法采用聚合酶链反应检测胰腺癌患者肿瘤组织和癌旁组织, 正常胰腺导管上皮细胞HPDE和人源胰腺癌Panc1和AsPc-1细胞中miR-135a-5p的表达;采用脂质体将miR-135a-5p mimic瞬时转染至Panc1和AsPc-1细胞中, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验和划痕实验检测各组细胞增殖能力和迁移能力;用不同浓度梯度的顺铂处理Panc1和AsPc-1细胞, 酶标仪检测各组细胞吸光度值变化, 以比较各组细胞顺铂化疗敏感性;使用在线软件预测miR-135a-5p下游靶基因, 并使用双荧光素酶报告基因系统进行验证;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)的表达水平。应用SPSS 18.0统计软件分析, 计量数据以均值±标准差(Mean±SD)表示, 组间比较使用单因素方差分析。结果胰腺癌组织中miR-135a-5p的表达显著低于癌旁组织(0.23±0.08比1.03±0.18), 人源胰腺癌Panc1和AsPc-1细胞中miR-135a-5p的表达显著低于正常胰腺导管上皮细胞HPDE(0.30±0.13, 0.56±0.09比0.97±0.12, P<0.05);miR-135a-5p mimic组Panc1和AsPc-1细胞增殖能力和迁移能力受到明显抑制(P<0.05), 细胞中BCAT1蛋白表达水平明显降低, 双荧光素酶报告基因实验证实miR-135a-5p可靶向调控BCAT1基因的表达。miR-135a-5p mimic组Panc1细胞对顺铂化疗敏感性明显提高(P<0.05)。Panc1细胞共转染miR-135a-5p mimic和BCAT1过表达载体, 可部分逆转miR-135a-5p上调介导的细胞增殖、迁移能力减弱和对顺铂化疗敏感性的增加。结论 miR-135a-5p在胰腺癌中低表达, 上调miR-135a-5p可通过靶向BCAT1基因抑制胰腺癌细胞增殖、迁移, 增加顺铂化疗敏感性。

• 单位
  天津市南开医院