Prohibitin表达及对乳腺癌细胞系MCF-7抑制生长的机制研究

作者：周晓艳; 李越; 何谦^*; 袁晓红; 张海宝

来源：现代检验医学杂志, 2020, 35(03): 6-19.

• 抗增殖蛋白
• 乳腺癌
• 增殖
• 凋亡

目的该研究从细胞水平研究了抗增殖蛋白(prohibitin)高表达在乳腺癌细胞中的生物学功能,并研究其抑制MCF-7生长的分子机制。方法使用基因重组法构建pEGFP-PHB重组质粒,脂质体瞬时转染乳腺癌细胞系MCF-7,real time-PCR和Western Blotting验证其高表达后,检测细胞生物学功能。包括:MTT(噻唑蓝)法检测细胞生长、流式细胞仪检测细胞周期与凋亡、肿瘤相关基因P53, Bcl-2, ERBB2及E2F-1的检测和Transwell小室侵袭实验。两样本差异比较采用t检验,多样本差异采用单因素方差分析。结果 MTT显示PHB高表达组在转染24, 48和72h对细胞生长的抑制率分别为20.98%, 14.93%和62.94%,差异有统计学意义;流式细胞仪检测细胞分裂周期,phb高表达G1期无差异,S期降低,G2期增加;凋亡检测中,高表达组细胞总凋亡率为33.67%±8.68%,阴性对照组的凋亡率12.13%±3.76%,空白对照组凋亡率为6.99%±2.33%,高表达组细胞凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(F=18.992, P=0.003);PHB高表达时,肿瘤相关蛋白P53和ERBB2的表达量高于对照组(t=4.590, P=0.044; t=9.489, P=0.011),Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(t=7.143, P=0.019),E2F-1蛋白各组间差异无统计学意义(t=2.175, P=0.162);PHB高表达组细胞侵袭能力低于对照组,差异有统计学意义(t=3.221, P=0.01;t=4.057, P=0.003)。结论 PHB高表达抑制S期DNA的合成,阻滞细胞于G2/M期,增加细胞凋亡率,抑制肿瘤细胞MCF-7的生长。其与肿瘤相关蛋白P53和ERBB2的增高,Bcl-2表达的降低紧密相关。

• 单位
  西安交通大学第二附属医院; 西安交通大学