植物雌激素大豆黄酮对牛乳腺上皮细胞增殖及细胞周期的影响

作者：谢娜娜; 闫书平; 张崇昊; 曹西月; 张源淑^*

来源：动物营养学报, 2022, 34(04): 2645-2653.

• MAC-T细胞
• 植物雌激素
• 大豆黄酮
• 细胞增殖
• 细胞周期

本试验采用大豆黄酮(DZ)作用于牛乳腺上皮MAC-T细胞，探讨其通过上调雌激素受体β(ERβ)表达对细胞体外增殖及细胞周期的影响，为DZ改善乳腺发育提供依据。采用不同浓度DZ(0～160.0μmol/L)处理MAC-T细胞24 h，通过检测细胞活力确定DZ作用浓度；然后采用不同浓度DZ(0、2.5、5.0和10.0μmol/L)处理MAC-T细胞12、24、36和48 h，通过检测细胞活力确定DZ作用时间；再用生理剂量的雌二醇(E2)作为阳性对照，对各处理细胞进行细胞计数，采用Western blot分析细胞内细胞周期相关蛋白、ERβ蛋白相对表达量，并用流式细胞技术分析细胞周期变化。结果表明：1)与对照组相比，2.5和5.0μmol/L DZ处理细胞均能提高MAC-T细胞活力，其中5.0μmol/L DZ处理显著提高细胞活力(P <0.05)；而在浓度高于10.0μmol/L后，细胞活力均有下降，因此确定了DZ作用的低、中和高浓度分别为2.5、5.0和10.0μmol/L；而与对照组相比，处理12 h后，5.0μmol/L DZ处理使得细胞活力显著提高(P<0.05)，其他2个浓度处理对细胞活力无显著影响(P>0.05)，因此确认DZ作用时间为12 h。2)与对照组相比，5.0μmol/L DZ处理使得细胞数量显著增加(P<0.05);2.5μmol/L DZ处理使得细胞数量有所增加，但差异不显著(P>0.05);E2处理使得细胞数量略低于各DZ处理，但差异不显著(P>0.05)。3)Western blot结果显示，与对照组相比，3个浓度DZ处理均可上调增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、细胞周期蛋白D3(CyclinD3)和ERβ的蛋白相对表达量，其中5.0μmol/L DZ处理显著上调PCNA、CyclinD1和ERβ的蛋白相对表达量(P<0.05)。4)与对照组相比，5.0μmol/L DZ处理极显著提高了G2-M期细胞占比(P<0.01)，同时极显著提高了S期细胞占比(P<0.01);E2处理与5.0μmol/L DZ处理趋势相同，均极显著提高了G2-M期细胞占比(P<0.01)，同时提高了S期细胞占比(P>0.05)。结果提示，植物雌激素DZ具有类雌激素样作用，可通过上调ERβ蛋白表达，提高G2-M细胞占比，阻滞细胞周期在S期，从而促进乳腺细胞的增殖。

• 单位
  农业部