A型口蹄疫病毒多基因重组腺病毒载体的构建

作者：孙普; 卢曾军; 刘霞; 李平花; 白兴文; 郭建宏; 包慧芳; 刘在新

来源：甘肃农业大学学报, 2008, (04): 17-22.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2008.04.021

• 口蹄疫病毒
• 腺病毒载体
• 体外连接 FMDV
• adenovirus vector
• in vitro ligation

采用体外连接法构建了含有A型口蹄疫病毒(FMDV)P1-2A和3C或3ABC基因的重组腺病毒表达载体.利用PCR技术分别扩增得到P1-2A、3C和3ABC基因,经XbaⅠ/BamHⅠ和BamHⅠ/KpnⅠ双酶切之后,与XbaⅠ/KpnⅠ双酶切的穿梭载体pShuttle2大片段连接,获得重组穿梭质粒pSh-P12a3c和pSh-P12a3abc.然后用I-CeuⅠ和PI-SceⅠ双酶切穿梭质粒回收目的基因表达盒,通过体外连接法将目的基因表达盒与BD Adeno-X Vi-rus DNA连接,转化DH5α感受态菌.获得两个重组腺病毒质粒分别命名为A-P12a3c和A-P12a3abc,经PCR、酶...

• 单位
  甘肃农业大学; 农业部; 中国农业科学院兰州兽医研究所