靶向人PDE5A3基因的shRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响

作者：潘运高; 刘继红; 詹鹰; 王涛; 万志华; 李忠远; 刘云

来源：中华男科学杂志, 2009, 15(08): 689-692.

DOI：10.13263/j.cnki.nja.2009.08.024

• 勃起功能障碍
• 阴茎海绵体
• 基因治疗
• 重组腺病毒
• 环磷酸鸟苷

目的:观察腺病毒载体介导特异性短发夹RNA(shRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为应用RNA干扰(RNAi)技术治疗阴茎勃起功能障碍(ED)提供实验依据。方法:成功构建携带3条针对人PDE5A3基因位点特异性shRNA的重组腺病毒(rAd5-shRNA-PDE5A3),并设立阴性对照病毒组和空白对照组,分别转染人阴茎海绵体平滑肌细胞。以放射免疫法分别检测转染重组腺病毒24、48、72h后细胞内cGMP浓度变化,观察rAd5-shRNA-PDE5A3对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:实验组rAd5-shRNA-PDE5A3转染人阴茎海绵体平滑肌细胞后胞内cGMP水平显著高于阴性对照组和空白对照组,在转染后72h最为显著。结论:3条特异性针对人PDE5A3mRNA靶位点的shRNA可有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,增强对PDE5基因的阻抑效果。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院