顺式阿曲库铵加重机械通气大鼠膈肌萎缩的研究

作者：周云; 伍长学; 刘力^*

来源：四川大学学报（医学版）, 2021, 52(06): 975-980.

• 顺式阿曲库铵
• 机械通气
• 膈肌萎缩
• 线粒体自噬
• 氯喹

目的研究神经肌肉阻断剂顺式阿曲库铵在机械通气SD大鼠膈肌萎缩中的作用及可能的机制。方法将30只成年雄性SD大鼠随机分为5组:(1)对照组(CON组,n=6),禁食30 h;(2)机械通气组(MV组,n=6),禁食6 h后机械通气24 h,同时持续泵入戊巴比妥钠+0.9%氯化钠;(3)机械通气+顺式阿曲库铵组(MVC组,n=6),禁食6 h后机械通气24 h,同时持续泵入戊巴比妥钠+顺式阿曲库铵;(4)机械通气+氯喹(chloroquine, CQ)组(QMV组,n=6),机械通气前24 h和前30 min腹腔注射自噬抑制剂CQ 30 mg/kg,其余操作同MV组;(5)机械通气+顺式阿曲库铵+CQ组(QMVC组,n=6),机械通气前24 h和前30 min腹腔注射自噬抑制剂CQ 30 mg/kg,其余操作同MVC组。各组大鼠于30 h后处死,取肋膈肌标本。HE染色观察膈肌纤维横截面积(cross-sectional area, CSA),免疫荧光染色观察线粒体外膜转移酶蛋白-20(TOM20)和微管相关蛋白1-轻链3(LC3)的共定位,Western blot检测肋膈肌中肌肉萎缩相关蛋白MAFbx、MURF-1,线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、P62、LC3的表达水平。结果 MV组和CON组相比,MVC组和MV组相比,CSA减小(P<0.05),MURF-1、MAFbx蛋白的表达量增加(P<0.05),TOM20和LC3的共表达的线粒体数量增加,LC3表达增加(P<0.05),PINK1、Parkin、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白的表达量增加(P<0.05),P62蛋白的表达量下降(P<0.05);QMV组和MV组相比、QMVC组和MVC组相比,CSA增大(P<0.05),MURF-1、MAFbx蛋白的表达量减少(P<0.05),TOM20和LC3的共表达的线粒体数量减少,LC3表达减少(P<0.05),PINK1、Parkin、LCⅡ/Ⅰ蛋白的表达量减少(P<0.05),P62蛋白的表达量增加(P<0.05)。结论机械通气24 h,引起SD大鼠膈肌萎缩;顺式阿曲库铵通过自噬-溶酶体(autophagy-lysosome, AL)途径加重机械通气大鼠的膈肌萎缩,此过程可能与PINK1-Parkin介导的线粒体自噬途径有关;氯喹通过阻断AL途径可改善顺式阿曲库铵引起的机械通气大鼠膈肌萎缩。

• 单位
  西南医科大学