细胞因子诱导的自然杀伤细胞培养体系的评价

作者：王娟; 桑圣刚; 郝新宝

来源：海南医学院学报, 2011, 17(03): 302-304.

DOI：CNKI:46-1049/R.20110329.1206.047

• 细胞因子诱导的自然杀伤细胞
• 细胞培养
• γ-干扰素
• 白介素-2
• 抗CD3单抗

目的:评价采用γ-干扰素(IFNγ-)、白介素-2(IL-2)、抗CD3单抗3因子对外周血来源的CIK细胞培养的效果。方法:采集17例实体肿瘤患者的外周血,分离单个核细胞培养,于培养第1天加入重组人IFN-γ,第2天加入抗人CD3单抗、重组人IL-2,隔天半量换培养液并添加人重组IL-2以维持其浓度,培养21 d收获细胞。于培养第1、7、14、21天进行细胞计数,同时于培养第1、8、14、21天测定细胞免疫表型。结果:细胞因子共刺激2～3 d即出现细胞集落,14 d后CIK细胞总数达(6～17)×109/L,较培养前扩增47～150倍,细胞存活率大于95%;具有免疫表型CD3+、CD4+、CD8+和CD3+CD56+细胞的平均值分别从培养前的(65.1±1.9)%、(36.9±0.8)%、(28.5±3.1)%、(1.8±0.4)%增加到培养第21天的(89.6±2.1)%、(50.1±1.9)%、(57.2±2.5)%、(36.1±4.2)%。结论:按照上述方法培养的CIK细胞在体外扩增率高,方法可行,CIK细胞在体外培养到14～21 d,CD3+CD56+呈现高表达,此时期适宜应用于临床治疗,且患者自体外周血易获得、整个培养过程简便,值得临床应用推广。

• 单位
  海南医学院; 海南医学院附属医院; 贵州中医药大学