摘要
目的 构建编码SARS-CoV S蛋白亚单位S1和S2的核酸疫苗,并检测其对小鼠的免疫应答.方法 依据GenBank中SARS-CoV基因组序列,人工合成SARS-CoV S1和S2亚单位基因,分别与CTL表位基因重组后,克隆至表达载体pIRESlneo中,构建DNA疫苗pIRCTL-S1和pIRCTL-S2.将构建的DNA疫苗转染BHK-21细胞,采用间接免疫荧光试验检测其在真核细胞中的表达.免疫小鼠后,用流式细胞仪测定CD4+、CD8+T淋巴细胞亚类数,用ELISA试剂盒检测免疫小鼠血清中抗SARS-CoV抗体水平.结果 所构建的DNA疫苗pIRCTL-S1和pIRCTL-S2转染BHK-21细胞后,均能表达抗原蛋白,免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖,并诱导产生抗SAILS-CoV特异性抗体.结论 所构建的两种DNA疫苗在小鼠体内均产生了体液和细胞免疫应答,为SARS核酸疫苗的研制奠定了基础.
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单位军事医学科学院