CXCL10基因对SH-SY5Y细胞氧化损伤、钙稳态及Nrf2/BNIP3的影响

作者：刘琳; 马倩; 万光宇^*; 田玲

来源：解剖学研究, 2023, 45(06): 511-522.

DOI：10.20021/j.cnki.1671-0770.2023.06.02

• 帕金森病
• 人神经母细胞瘤细胞
• CXC趋化因子配体10
• 氧化损伤
• 钙稳态失衡

目的 探讨CXC趋化因子配体10(CXCL10)基因对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y氧化损伤、钙稳态失衡及核因子E2相关因子2(Nrf2)、BCL2相互作用蛋白3(BNIP3)表达的影响。方法 采用H2O2损伤SH-SY5Y细胞，分为对照组(未经H2O2损伤的SH-SY5Y细胞)、模型组(H2O2干预的SH-SY5Y细胞)、NC-siRNA组(H2O2干预的SH-SY5Y细胞转染NC-siRNA)及CXCL10-siRNA组(H2O2干预的SH-SY5Y细胞转染CXCL10-siRNA),peDNA3.1.D组(H2O2干预的SH-SY5Y细胞转染空载体)及CXCLl0/peDNA3.1组(H2O2干预的SH-SY5Y细胞转染CXCL10/peDNA3.1)。采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测各组细胞CXCL10 mRNA、MTT检测各组细胞活性、相关试剂盒检测氧化应激指标、流式细胞仪检测各组细胞Ca2+荧光强度和免疫印迹检测各组细胞Nrf2、BNIP3表达。结果 对照组、模型组、NC-siRNA组、CXCL10-siRNA组、peDNA3.1.D组和CXCLl0/peDNA3.1组中CXCL10 mRNA水平分别为1.02±0.08、1.44±0.14、1.40±0.17、0.73±0.05、1.49±0.18和2.20±0.16，差异有统计学意义(F=77.400,P<0.05)；与对照组相比，模型组细胞活性、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、Nrf2、BNIP3降低，丙二醛(MDA)、Ca2+荧光强度升高(P<0.05)；模型组、NC-siRNA组、peDNA3.1.D组上述指标比较无意义(P>0.05)，与模型组相比，CXCL10-siRNA组细胞活性、GSH、SOD、CAT、Nrf2、BNIP3升高(P<0.05),MDA、Ca2+荧光强度升降低(P<0.05),CXCL10/peDNA3.1组细胞活性、GSH、SOD、CAT、Nrf2、BNIP3降低(P<0.05),MDA、Ca2+荧光强度升高(P<0.05)。结论 下调CX-CL10基因可提高H2O2损伤后SH-SY5Y细胞活性，并可抗氧化应激，降低细胞内游离Ca2+水平，这可能与激活Nrf2/BNIP3信号通路相关。

• 单位
  神经内科; 解放军总医院