神经肽PACAP27抑制线粒体依赖性细胞凋亡途径对环磷酰胺所致大鼠睾丸损伤的改善作用

作者：廖源; 王开举; 李浩僡; 陈惠萍; 李选逸; 黄勇^*

来源：吉林大学学报(医学版), 2022, 48(05): 1266-1275.

DOI：10.13481/j.1671-587X.20220521

• 睾丸损伤
• 环磷酰胺
• 垂体腺苷酸环化酶激活多肽27
• 线粒体依赖性凋亡途径

目的：探讨垂体腺苷酸环化酶激活多肽（PACAP） 27对环磷酰胺所致大鼠睾丸损伤的作用，阐明其可能机制。方法：60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、PACAP27组和左卡尼汀组，每组15只；除对照组外，其余各组大鼠采用环磷酰胺造模并给药。给药结束后第3天，称量大鼠体质量和睾丸质量，计算睾丸指数；采用放射免疫法检测各组大鼠血清中促卵泡激素（FSH）、黄体生成素（LH）和睾酮（T）水平，HE染色观察各组大鼠睾丸组织病理形态表现，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组大鼠睾丸组织中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）水平，TUNEL染色检测各组大鼠睾丸组织细胞凋亡率，Western blotting法检测各组大鼠睾丸组织中线粒体凋亡途径相关蛋白表达水平；提取睾丸组织线粒体，采用线粒体分离试剂检测各组大鼠睾丸组织中线粒体膜通透性转换孔（mPTP）开放程度，JC-1荧光染色检测各组大鼠睾丸组织线粒体膜电位。结果：与对照组比较，模型组大鼠体质量、睾丸质量和睾丸指数均降低（P<0.05），血清中FSH、LH和T水平降低（P<0.05），睾丸组织中SOD和CAT活性降低（P<0.05）,MDA水平升高（P<0.05），睾丸组织发生明显病理损伤，细胞凋亡率升高（P<0.05），睾丸组织中细胞色素C(Cyt C)、B细胞淋巴瘤2相关X蛋白（Bax）、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3 (caspase-3)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9 (caspase-9)蛋白表达水平升高（P<0.05）,B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)蛋白表达水平降低（P<0.05）,mPTP开放程度增强（P<0.05），线粒体膜电位降低（P<0.05）。与模型组比较，PACAP27组和左卡尼汀组大鼠睾丸质量和睾丸指数均升高（P<0.05），血清中FSH、LH和T水平升高（P<0.05），睾丸组织中SOD和CAT活性升高（P<0.05）,MDA水平降低（P<0.05），睾丸组织病理损伤得到改善，细胞凋亡率降低（P<0.05），睾丸组织中Cyt C、Bax、caspase-3和caspase-9蛋白表达水平降低（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05）,mPTP开放程度降低（P<0.05），线粒体膜电位升高（P<0.05）。结论：PACAP27可能通过抑制线粒体依赖性细胞凋亡途径减轻环磷酰胺所致大鼠睾丸损伤。

• 单位
  海南医学院第二附属医院