鲍曼不动杆菌外膜蛋白OMP33-36抗原多表位的构建与筛选

作者：邓凯丽; 刘星; 陈思遐; 杜兴冉; 冯旰珠

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2017, 37(07): 540-544.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2017.07.011

• 鲍曼不动杆菌
• OMP33-36
• 抗原表位

目的筛选鲍曼不动杆菌外膜蛋白(outer membrane protein 33×10336×103,OMP33-36)抗原的B细胞、T细胞表位。方法运用生物信息学软件预测OMP33-36蛋白分子小鼠B细胞及T细胞表位并人工合成相应肽段;构建重组质粒pET-30a-OMP33-36并原核表达、纯化获得OMP33-36蛋白;以OMP33-36蛋白免疫BALB/c小鼠,5周后收集小鼠血清并分离小鼠脾脏细胞。间接ELISA法检测小鼠血清中B细胞表位抗体水平,双夹心ELISA法检测经候选T细胞表位体外刺激后脾细胞分泌IFN-γ量。结果构建候选B细胞和T细胞表位各3条,分别为PB1、PB2、PB3,PT1、PT2、PT3;间接ELISA结果显示,PB1及PB2与OMP33-36蛋白免疫组小鼠血清发生反应,其A450值与对照组相比显著升高(P<0.05);双夹心ELISA结果显示,PT3刺激免疫组小鼠脾脏细胞产生的IFN-γ量与对照组相比显著升高(P<0.05)。结论成功构建并筛选出鲍曼不动杆菌OMP33-36蛋白的2个B细胞表位PB1及PB2,1个T细胞表位PT3。

• 单位
  南京医科大学第二附属医院