摘要

【目的】基于转录组测序(RNA-Seq)分析白藜芦醇促进努比亚山羊肌内脂肪沉积的机制,以期找到白藜芦醇影响肌内脂肪沉积的候选基因及调控网络。【方法】采用转录组测序技术对饲料中添加600 mg/kg白藜芦醇组山羊的背最长肌和对照组山羊的背最长肌进行分析。利用edgeR软件进行差异基因(Differentially expressed genes,DEGs)筛选[Fold Change≥2,错误发现率(FDR)<0.05],并对DEGs进行GO功能注释和KEGG富集分析。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测P13K-AKT信号通路关键基因及脂肪分化标志基因的表达。【结果】600 mg/kg白藜芦醇组山羊肌内脂肪含量极显著高于对照组(P<0.01,下同)。RNA-Seq结果显示共筛选出399个DEGs,包括328个上调基因及71个下调基因。DEGs共注释到48个条目,主要包括细胞过程、单有机体过程、细胞、绑定和催化活性。KEGG通路富集分析发现,DEGs主要富集到252个通路,主要包括P13K-AKT信号通路、MAPK信号通路、AMPK信号通路等与脂肪代谢相关的通路,从中进一步筛选出可能参与肌内脂肪沉积的基因(IGFBP7和IRX3)。qRT-PCR结果显示,试验组山羊背最长肌P13K-AKT信号通路关键基因(P13K、AKT和MTOR)和脂肪分化标志基因(PPARγ、FAS和CEBPα)的表达量极显著高于对照组。50μmol/L RSV诱导肌细胞8 d后发现,脂滴极显著多于对照组,P13K、AKT、MTOR、PPARγ、FAS和CEBPα的表达量极显著高于对照组。【结论】基于RNA-Seq分析白藜芦醇促进努比亚山羊肌内脂肪沉积的机制,结合其诱导肌细胞成脂分化,猜测白藜芦醇可能通过P13K-AKT信号通路促进努比亚山羊肌内脂肪的沉积。