转录因子7-like 2基因沉默对原发性肝癌Th1/Th2免疫漂移与微血管密度的调控作用研究

作者：朱冬梅; 唐翀; 朱斌^*

来源：免疫学杂志, 2021, 37(11): 930-938.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20210131

• 原发性肝癌
• 转录因子7-like 2
• 微血管密度
• Th1/Th2免疫漂移

目的探究转录因子7-like 2(transcription factor 7-like 2,TCF7L2)对原发性肝癌大鼠Th1/Th2免疫漂移及微血管密度(microvessel density,MVD)形成的影响。方法 60只Wistar大鼠根据随机数字表法分为空白对照组、模型组、si-NC组和siTCF7L2组,每组15只。除空白对照组外,其余3组大鼠通过饮用二乙基亚硝胺(DEN)制备原发性肝癌模型。14周后,si-NC组大鼠尾静脉注射阴性对照慢病毒混合液,si-TCF7L2组大鼠尾静脉注射LV-TCF7L2-siRNA慢病毒混合液,空白对照组和模型组大鼠注射等体积生理盐水,每日1次,连续7 d。6周后,大鼠腹主动脉采血,全自动血液分析仪检测血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)及总胆红素(TBIL)含量;ELISA法检测干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-2(IL-2)、IL-4和IL-10含量;HE染色观察大鼠肝组织形态学变化;免疫荧光染色检测大鼠肝组织血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达;免疫组织化学染色检测大鼠肝组织INF-γ、IL-4表达及MVD形成情况;实时荧光定量PCR检测肝组织中转录因子T-bet和Gata-3 m RNA表达;流式细胞术检测脾脏淋巴细胞Th1、Th2比例及Th1/Th2比值。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血清中ALT、AST、TBIL升高(P<0.01),IL-2、IFN-γ水平下降,IL-4、IL-10水平升高,IFN-γ/IL-4比例降低(P<0.01),肝组织出现肿瘤细胞,排列紊乱且核质变大、核仁突出,VEGF和IL-4表达水平变高,IFN-γ表达水平降低(P<0.01), MVD增加(P<0.01),T-bet mRNA相对表达量下调,Gata-3 mRNA相对表达量上调(P<0.01),Th1细胞比例减少,Th2细胞比例增加,Th1/Th2比值降低(P<0.01)。与模型组比较,si-TCF7L2组大鼠血清中ALT、AST、TBIL降低(P<0.01),IL-2、IFN-γ水平升高,IL-4、IL-10水平下降,IFN-γ/IL-4比例升高(P<0.01),肝组织癌变程度减小,VEGF和IL-4表达水平降低,IFN-γ表达水平升高(P<0.01), MVD减少(P<0.01),T-bet m RNA相对表达量上调,Gata-3 mRNA相对表达量下调(P<0.01);同时,Th1细胞比例增加而Th2细胞比例减少,Th1/Th2比值升高(P<0.01)。结论沉默TCF7L2表达可效抑制原发性肝癌大鼠模型瘤体中微血管密度,调节Th1/Th2比例趋于正常。

• 单位
  南通大学