UVB对Jurkat T细胞自噬和UVRAG表达的影响

作者:钱革; 胡桂兰; 韩露露; 冉昕; 邓丹琪; 张佩莲
来源:中国皮肤性病学杂志, 2014, 28(11): 1113-1129.
DOI:10.13735/j.cjdv.1001-7089.2014.1113

摘要

目的观察UVB对人急性T淋巴细胞白血病细胞系细胞(Jurkat T细胞)自噬和紫外线抵抗相关基因(UVRAG)表达的影响。方法 UVB照射Jurkat T细胞,MTT法观察UVB照射对细胞的存活力的影响;Western blotting法检测UVB照射后细胞LC3Ⅱ/Ⅰ的变化;转染GFP-LC3质粒标记细胞,使用激光共聚焦显微镜观测照射后细胞LC3的分布和表达。qRT-PCR的方法检测照射后UVRAG和Beclin 1mRNA的表达。结果 UVB对Jurkat T细胞增殖有一定影响,呈现剂量、时间效应关系。UVB照射后,LC3Ⅱ/Ⅰ的水平随着观察时间的延长而增高。照射后12h,LC3Ⅱ/Ⅰ的水平随着照射强度增加而升高(P均<0.05);照射后24h,50mJ/cm2UVB照射组LC3Ⅱ/Ⅰ达到最大(P均<0.05)。UVB照射后细胞质有明显的GFP-LC3绿色荧光致密斑形成,成散点状分布。50mJ/cm2UVB照射组,随着观察时间的延长,UVRAG的mRNA表达明显增加,各组之间差异有统计学意义(P均<0.05);照射后12h,24h,100mJ/cm2作用后UVRAG的表达均低于50mJ/cm2(P均<0.05),高于25mJ/cm2(P均<0.05)。照射后不同时间组(12h,24h),100 mJ/cm2UVB照射后Beclin 1的表达均高于50mJ/cm2,但差异无统计学意义(P均>0.05),且均大于25mJ/cm2组(P均<0.05)。结论 UVB可以诱导Jukat T细胞产生自噬,UVRAG参与了UVB诱导自噬发生的过程。

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