摘要
将鸡传染性支气管炎病毒S1基因插入到鸡痘病毒转移载体pSY681中,获得重组转移载体pSY681。将pSY681-IBVS1转染已感染亲本鸡痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞,使其在鸡胚成纤维细胞内与鸡痘病毒基因组发生同源重组,产生表达鸡IBVS1蛋白的重组鸡痘病毒rFPV-IBVS1。在含有X-gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选且进一步纯化14代。S1基因的PCR检测表明,获得的含传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒能够稳定遗传,间接免疫荧光和Westernblot等试验证实该重组病毒在CEF内真实地表达了分子量约为90Ku的具有免疫学活性的IBVS1糖蛋白。
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单位中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 内蒙古农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室; 动物科技学院