不同营养状态下柯萨奇病毒B3感染HeLa细胞后对mTOR及p70S6K mRNA的影响

作者：成亮; 陈淳媛; 朱咏贵; 黄利华; 闾宏伟; 杨作成

来源：中华实用儿科临床杂志, 2013, (10): 733-736.

• 柯萨奇病毒B3
• Hela细胞
• 血清剥夺
• mTOR

目的探讨不同营养状况下柯萨奇病毒B3(CVB3)感染HeLa细胞对mTOR信号通路的影响。方法采用非饥饿法和饥饿法2种方法培养HeLa细胞。(1)非饥饿法:HeLa细胞融合成40%～50%的单层细胞时,用含10g/L胎牛血清的细胞培养液换液培养24 h后,病毒组用100倍半数感染量(100 TCID50)的病毒干预,而对照组用病毒维持液(含胎牛血清2 g/L细胞培养液)培养;(2)"饥饿法";待HeLa细胞融合成40%～50%的单层细胞时,用不含胎牛血清的培养基换液培养24 h后,病毒组用100 TCID50的病毒干预,而对照组用病毒维持液(含胎牛血清2g/L的细胞培养液)培养。采用倒置显微镜观察细胞形态学变化,用实时荧光定量PCR检测3、6、9、12、24 h不同时间点饥饿法及非饥饿法不同营养状态下HeLa细胞mTOR、p70S6KmRNA表达。结果非饥饿法:病毒组仅在12 h及24 h mTOR、p70S6K mRNA表达显著低于对照组(P均<0.05);饥饿法:病毒组各时间点均显著低于对照组(P均<0.05);饥饿法病毒组和对照组Hela细胞rmTOR、p70S6K mRNA表达均高于非饥饿法,mTOR mRNA差异均有统计学意义(P均<0.05),而p70S6K mRNA差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 CVB3使HeLa细胞mTOR-P70S6K信号通路表达下调。

• 单位
  中南大学湘雅三医院