急性期恶性疟患者外周血PD-1+TIGIT+T细胞功能

作者：黄雅倩; 王蓓蓓; 宋蕊; 徐晓雪; 赵雪; 王芯栎; 陈晨^*

来源：中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2021, 15(06): 385-393.

• 恶性疟
• 急性期
• T淋巴细胞
• 共抑制分子
• 多色流式细胞术

目的 研究急性期恶性疟患者外周血T淋巴细胞共抑制分子PD-1和TIGIT的表达模式及功能。方法 收集2019年4月至2019年10月首都医科大学附属北京地坛医院感染二科14例非洲输入型急性期恶性疟患者发病后4～12 d和28例健康对照者外周血单个核细胞。流式细胞术检测患者外周血CD4+T和CD8+T淋巴细胞PD-1-TIGIT-、PD-1+TIGIT-、PD-1-TIGIT+和PD-1+TIGIT+四个亚群比例，比较各细胞亚群凋亡(Annexin V+)、增殖(Ki67+)、分泌细胞因子(IFN-γ+、IL-2+和TNF-α+)和杀伤(Granzyme B+和Perforin+)能力差异，正态分布资料采用one-way ANOVA检验进行方差分析，Holm-Sidak’s进行多重比较；偏态分布资料则采用Kruskal-Wallis检验进行分析，Bonferroni法进行多重比较。统计患者临床资料并分析急性期恶性疟患者T细胞各亚群比例和CD8+T细胞杀伤能力与临床指标的相关性，正态分布资料采用Pearson相关性分析，非正态分布资料采用Spearman相关性分析。结果 与健康对照组相比，急性期恶性疟患者CD4+T和CD8+T细胞中PD-1+和PD-1+TIGIT+细胞比例均显著增高(CD4:t=4.85、P <0.001,t=4.77、P=0.0002;CD8:t=3.90、P=0.001、t=3.29、P=0.0021);CD4+T细胞TIGIT+亚群增加(t=4.12、P=0.0002)。CD4+T细胞和CD8+T细胞PD-1+TIGIT-和PD-1+TIGIT+细胞亚群Annexin V+表达比例均显著高于PD-1-TIGIT-细胞亚群(F=4.67、P=0.0125,F=3.19、P=0.0460)，但CD4+T细胞PD-1+TIGIT-和PD-1+TIGIT+细胞亚群Ki67+和IFN-γ+表达比例均显著高于PD-1-TIGIT-细胞亚群(H=17.80、P=0.0005,F=11.22、P=0.0002),CD8+T细胞PD-1+TIGIT-和PD-1+TIGIT+细胞亚群IFN-γ+、IL-2+和Granzyme B+表达比例均显著高于PD-1-TIGIT-细胞亚群(F=7.95、P=0.047,H=8.29、P=0.0404,F=12.18、P <0.001)。急性期恶性疟患者CD4+和CD8+T细胞各亚群比例与患者临床参数相关性分析发现CD4+T细胞PD-1+TIGIT+表达比例与RBC计数和HGB浓度呈负相关(r=-0.3861、P=0.0116,r=-0.3980、P=0.0091)。CD8+T细胞杀伤能力与患者临床参数相关性分析发现CD8+T细胞Granzyme B+和Perforin+表达比例与Cr浓度呈显著负相关(r=-0.4812、P=0.0201,r=-0.6255、P=0.0014)。结论 急性期恶性疟患者外周血T细胞PD-1和TIGIT表达上调，仍具有较强的增殖、杀伤和分泌细胞因子的能力，并未表现出典型的T细胞耗竭表型。患者CD4+T细胞PD-1+TIGIT+表达比例增高可能与机体严重的红细胞破坏和溶血有关，CD8+T细胞Granzyme B+和Perforin+表达比例增高可能与肾脏功能损伤程度有关。

• 单位
  首都医科大学附属北京地坛医院