G6PD缺乏症基因诊断方法的建立

作者：李印淑; 刘晶晶; 刘福平; 刘梦莹; 李维; 刘丽益; 张静

来源：检验医学与临床, 2016, 13(z1): 6-9.

DOI：10.3969/j.issn.1672-9455.2016.25.003

• 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶
• 基因突变
• 多重Taqman MGB探针荧光PCR法
• 基因诊断

目的：建立有效可行的葡萄糖‐6‐磷酸脱氢酶（glucose‐6‐phosphate dehydrogenase ，G6PD）缺乏症基因突变型检测的经济、快速、无污染的实用方法。方法建立多重 Taqman MGB 探针荧光 PCR体系，对6种国内主要基因突变型（1376G＞ T、1388G＞ A、95A＞G、871G＞A、392G＞ T、1024C＞ T ）进行突变检测，同时加入βactin基因作内参对整个PCR体系进行监控。用30份已知基因型样品进行重复性检测实验。对200例未知样本同时用多重 Taqman MGB探针荧光法和DNA直接测序法进行检测验证。结果建立的多重Taqman MGB探针荧光PCR法同时检测6个国内最常见G6PD基因突变位点，可在1小时内出检测结果，批内与批间的重复性均为100％。200例未知基因型样本检出34例突变，Taqman MGB探针荧光 PCR法分型结果与DNA直接测序法检测结果一致，阳性符合率、阴性符合率均为100％。结论建立的多重Taqman MGB探针荧光PCR法，可在1小时内出结果，PCR后无需开管，是一种快速、有效可行的G6PD缺乏症基因诊断方法。

• 单位
  深圳市南山区妇幼保健院